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應用案例
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產褐藻膠裂解酶菌株篩選與高產酶菌株的ARTP誘變選育

來源:   作者: 發布日期:2022-09-15 訪問量:4637

本期為您推薦河北農業大學黃惠琴研究員研究團隊發表在知名期刊《中國釀造》上的一篇文章:產褐藻膠裂解酶菌株篩選與高產酶菌株的ARTP誘變選育。

 

文章摘要內容如下:

褐藻膠裂解酶是制備生物活性寡糖的重要工具酶,可通過β-消除反應將褐藻酸鈉降解為在非還原端具有雙鍵的不飽和寡糖,在食品、農業、工業等行業具有重要的應用價值。由于現有微生物產酶量少、酶活低,限制了其進一步開發應用,尋找新的高效產酶菌、深入研究酶的產生條件、提高菌株發酵酶活力是迫切需要解決的問題。誘變是提高微生物發酵產酶水平的有效方法之一,已成為微生物誘變育種的重要技術。常壓室溫等離子體(ARTP)誘變是一種基于大氣環境溫度和射頻等離子體的新型微生物誘變育種技術,可在大氣壓和室溫條件下高效誘導脫氧核糖核酸斷鏈,具有條件溫和、成本低、效率高的特點,是微生物基因組的高效快速誘變育種技術。

本研究采用平板酶解圈法從南海海域海藻、動物及沉積物樣品中篩選產褐藻膠裂解酶細菌,對篩選菌株進行分子生物學鑒定,并利用ARTP誘變技術選育高產褐藻膠裂解酶菌株。結果表明,共分離篩選得到酶活較高的細菌14株,16S rDNA比對分析結果表明,它們隸屬于3個門、5個綱、7個目、8個科、9個屬,其中有5株菌(占35.7%)可能代表著新的分類單元。以高產褐藻膠裂解酶海藻類芽孢桿菌(Paenibacillus algicola)HB172198T作為原始菌株,利用ARTP誘變技術選育獲得2株褐藻膠裂解酶活力明顯提高的突變株(編號分別為30-19、80-6),其酶活力分別比原始菌株提高了32.6%和21.6%,且連續6次傳代培養誘變菌株的產酶遺傳性狀穩定。

 

文章精彩內容如下:

圖片1


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褐藻膠裂解酶是制備生物活性寡糖的重要工具酶,可通過β-消除反應將褐藻酸鈉降解為在非還原端具有雙鍵的不飽和寡糖,在食品、農業、工業等行業具有重要的應用價值。由于現有微生物產酶量少、酶活低,限制了其進一步開發應用,尋找新的高效產酶菌、深入研究酶的產生條件、提高菌株發酵酶活力是迫切需要解決的問題。誘變是提高微生物發酵產酶水平的有效方法之一,已成為微生物誘變育種的重要技術。常壓室溫等離子體(ARTP)誘變是一種基于大氣環境溫度和射頻等離子體的新型微生物誘變育種技術,可在大氣壓和室溫條件下高效誘導脫氧核糖核酸斷鏈,具有條件溫和、成本低、效率高的特點,是微生物基因組的高效快速誘變育種技術。

本研究采用平板酶解圈法從南海海域海藻、動物及沉積物樣品中篩選產褐藻膠裂解酶細菌,對篩選菌株進行分子生物學鑒定,并利用ARTP誘變技術選育高產褐藻膠裂解酶菌株。結果表明,共分離篩選得到酶活較高的細菌14株,16S rDNA比對分析結果表明,它們隸屬于3個門、5個綱、7個目、8個科、9個屬,其中有5株菌(占35.7%)可能代表著新的分類單元。以高產褐藻膠裂解酶海藻類芽孢桿菌(Paenibacillus algicola)HB172198T作為原始菌株,利用ARTP誘變技術選育獲得2株褐藻膠裂解酶活力明顯提高的突變株(編號分別為30-19、80-6),其酶活力分別比原始菌株提高了32.6%和21.6%,且連續6次傳代培養誘變菌株的產酶遺傳性狀穩定。

 

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